細胞消化的小技巧

不一定要一次把所有細胞都要消化下來！

晃動培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察，只要70~80%細胞都收縮了或超過適合消化時間，就該終止消化反應，如果細胞量夠即可進行后續(xù)傳代或實驗步驟；如果細胞量不夠，則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細胞，再進行一次消化反應。

▲ 消化不下來的細胞（黃）請視情況決定是否再消化一次。

不一定要吹打成W全單細胞懸液！

一般細胞脫離培養(yǎng)底物、并經(jīng)過5~10次輕柔吹打后，會在細胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細胞)，所以不需要過度延長消化時間想讓細胞分離成單細胞懸液。

消化效果不佳，先提升消化液濃度、再加長作用時間！

當你選定了一種消化方式 (物理機械法除外)，發(fā)現(xiàn)效果不佳，首先應考慮提高EDTA或胰酶濃度，效果再不佳才加長消化的作用時間，避免細胞長時間浸泡在消化液中造成的細胞膜損傷。

（一般消化液使用：0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘；0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分鐘）

結語

細胞消化 ，是一個看似很簡單，但是有很多技術含量的步驟。消化好壞、是否污染、有無受傷，都在這短短的五六分鐘里決定。

當我們已經(jīng)可以順利操作細胞培養(yǎng)實驗，接下來要思考的，就是如何讓細胞長得更健康、更均一、做出來的實驗才會更好。

祝各位的細胞都顆顆透亮、粒粒分明、活力旺盛！

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