THP-1基因敲除細胞是通過CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)實現(xiàn)的，用于研究免疫和炎癥相關(guān)機制。借助CRISPR/Cas9技術(shù)及雅吉生物的高效編輯服務，科研人員可更精準地進行基因功能研究和藥物靶點篩選，為免疫疾病與感染治療開辟新思路例如，通過設(shè)計特定的sgRNA序列并將其與Cas9酶結(jié)合，可以實現(xiàn)對THP-1細胞中目標基因的敲除，從而研究基因功能及其在疾病中的作用

研究者可以通過以下步驟構(gòu)建基因敲除細胞：

設(shè)計并驗證sgRNA序列，確保其能夠準確引導Cas9酶切割目標基因。

構(gòu)建表達載體，將sgRNA和Cas9基因克隆到載體中，并通過轉(zhuǎn)染方法導入THP-1細胞

通過篩選和克隆技術(shù)選擇成功敲除目標基因的細胞亞群。

例如，已有研究成功利用CRISPR/Cas9技術(shù)在THP-1細胞中敲除了GPR108基因，并通過PCR和測序驗證了敲除效果

。 此外，還有研究通過類似方法敲除了其他基因（如S100A9、KCNN4等），進一步揭示了THP-1細胞在免疫反應中的作用

THP-1基因敲除細胞為研究免疫調(diào)控、信號通路及疾病模型提供了重要工具

THP-1細胞基因敲除的標準流程（基于慢病毒技術(shù)）

在THP-1細胞中實現(xiàn)高效基因敲除，需經(jīng)過以下幾個核心步驟：

1.靶向設(shè)計與載體構(gòu)建：依據(jù)目標基因的關(guān)鍵外顯子區(qū)域設(shè)計sgRNA，并構(gòu)建至慢病毒載體系統(tǒng)中；

2.慢病毒制備與細胞感染：使用HEK293T細胞進行病毒包裝，優(yōu)化感染MOI并借助Polybrene提高感染效率；

3.篩選與單克隆擴增：利用抗生素篩選獲得Cas9穩(wěn)定表達株及sgRNA陽性克隆，并進行單細胞克隆擴增；

4.基因敲除驗證：通過測序、酶切分析及Western blot驗證目標基因的敲除效率，確保純合克隆的獲得。

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